Hujayra liniyasi va hujayra bankini aniqlash
Hujayra liniyasi va hujayra bankini identifikatsiya qilish tartibga soluvchi talab hisoblanadi. Antikor preparatlari, oqsil preparatlari va hujayra terapiyasi mahsulotlarida ishlatiladigan hujayra chiziqlari va hujayra banklari ularning sifati, tozaligi va xavfsizligini ta'minlashi kerak. To'g'ri hujayra liniyasi va hujayra bankini aniqlash biofarmatsevtikani ishlab chiqarishda juda muhimdir.
Hujayra chizig'i va hujayra bankini aniqlash usullari
Hujayra liniyasi va hujayra banki identifikatsiyasi birinchi navbatda asosiy hujayra banklari (MCB) va ishlaydigan hujayra banklari (WCB) ga qaratilgan. Bundan tashqari, tadqiqot hujayra banklari (RCB) odatda MCB ishlab chiqarish uchun GMP qurilmalariga kiritilgunga qadar mikobakterial va sterillik tekshiruvidan o'tadi. Ishlab chiqaruvchilar, shuningdek, maxsus virus testini talab qilishlari mumkin.
Amaldagi qoidalarga ko'ra (masalan, ICH Q5A/Q5B/Q5D), hujayra liniyasi va hujayra bankini identifikatsiyalash asosan quyidagi jihatlarni o'z ichiga oladi: hujayra identifikatsiyasi, bepushtlik testi, mikoplazma testi, endogen va ekzogen virusli kontaminatsiyani tekshirish va o'simtani aniqlash testi. HyQure Biotech tomonidan taqdim etilgan sinov elementlari va usullari quyida tavsiflangan:
|
Sinov elementlari |
Aniqlash usullari |
|
|
Hujayra identifikatsiyasi |
Izozimlar, CO1, STRlar, turlarni aniqlash |
|
|
Bakterial va qo'ziqorinlarni tekshirish |
Membranani filtrlash, to'g'ridan-to'g'ri emlash va nafas olish signali usuli |
|
|
Mikoplazma testi |
To'g'ridan-to'g'ri ekish usuli, indikator hujayra madaniyati usuli, qPCR usuli (mikoplazma va spiroplazmani tekshirish uchun) |
|
|
Mikobakteriya testi |
Madaniyat usuli, qPCR usuli |
|
|
Ekzogen va endogen viruslarni tekshirish |
Hujayra morfologiyasini kuzatish va qon adsorbsiyasi |
Hujayra madaniyati morfologiyasini kuzatish va qon adsorbsiyasi testi |
|
Turli indikator hujayralarni in vitroda ekish |
Sitopatik ta'sirni tekshirish |
|
|
Hayvonlar va tovuqlarning embrionlangan tuxumlarini in vivo jonli emlash |
Tovuqlarning embrionlangan tuxumlari, emizuvchi va kattalar sichqonlari va boshqalar. |
|
|
Retrovirus testi |
Infektsion test, elektron mikroskop, teskari transkriptaza faolligi (TEM-PERT) |
|
|
Turlarga-maxsus virus testi |
Sichqoncha-oliy, odam{1}}olma, maymun- |
|
|
Sigirlar virusini tekshirish |
Sitopatik ta'sirni tekshirish, qPCR usuli |
|
|
Cho'chqa virusini tekshirish |
Sitopatik ta'sirni tekshirish, qPCR usuli |
|
|
Boshqa maxsus virus testlari |
Sichqoncha parvovirus testi va boshqalar. |
|
|
O'simtani tekshirish |
Hayvonlar tajribalari |
|